柱前衍生(shēng)法和(hé)柱後衍生(shēng)法各有(yǒu)其優缺點
柱前衍生(shēng)法的優點:
相對自由地選擇反應條件;
不存在反應動力學的限制(zhì);
衍生(shēng)化的副産物可(kě)進行(xíng)預處理(lǐ)以降低(dī)或消除其幹擾;
容易允許多(duō)步反應的進行(xíng);
有(yǒu)較多(duō)的衍生(shēng)化試劑可(kě)選擇;
不需要複雜的儀器(qì)設備。
缺點:
形成的副産物可(kě)能對色譜分離造成較大(dà)困難;
在衍生(shēng)化過程中,容易引入雜質或幹擾峰,或使樣品損失。
柱後衍生(shēng)法的優點:
形成副産物不重要,産物也不需要高(gāo)的穩定性,隻需要有(yǒu)好的重複性即可(kě);
被分析物可(kě)以在其原有(yǒu)的形式下進行(xíng)分離,容易選用已有(yǒu)的分析方法。
缺點:
需要額外的設備,對儀器(qì)要求比較高(gāo);
反應器(qì)可(kě)造成峰展寬,降低(dī)分辨率;有(yǒu)過量的試劑會(huì)造成幹擾。
由于柱後衍生(shēng)化法受儀器(qì)的制(zhì)約,多(duō)數(shù)還(hái)是采用柱前衍生(shēng)化法。下面詳細介紹一下柱前衍生(shēng)化法。
1. 柱前衍生(shēng)化的目的
柱前衍生(shēng)化就是在色譜分離之前将樣品與一定的化學試劑發生(shēng)化學反應,将樣品中的目标化合物制(zhì)備成适當的衍生(shēng)物,然後再用色譜進行(xíng)分離檢測。
①将一些(xiē)不适合某種色譜技(jì)術(shù)分析的化合物轉化成可(kě)以用該種色譜技(jì)術(shù)分析的衍生(shēng)物。如某些(xiē)無法氣化或熱不穩定的化合物不能用氣相色譜分析,通(tōng)過衍生(shēng)化轉化成可(kě)以汽化的或熱穩定的衍生(shēng)物,然後再用氣相色譜分析。
②提高(gāo)檢測的靈敏度,如很(hěn)多(duō)化合物û有(yǒu)紫外吸收或紫外吸收很(hěn)弱,而其它檢測方法靈敏度又不夠,這就可(kě)以通(tōng)過衍生(shēng)化反應給這些(xiē)化合物接上(shàng)一個(gè)有(yǒu)強紫外吸收的基團,以此來(lái)提高(gāo)這些(xiē)化合物的檢測靈敏度。又如氣相色譜的電(diàn)子捕獲檢測器(qì)對含±素的化合物有(yǒu)很(hěn)高(gāo)的靈敏度,可(kě)以通(tōng)過衍生(shēng)化反應将一些(xiē)化合物接上(shàng)±素基團,提高(gāo)這些(xiē)化合物的檢出靈敏度。
③改善分離度。如一些(xiē)異構體(tǐ)在色譜上(shàng)很(hěn)難分離,通(tōng)過衍生(shēng)化反應,使兩個(gè)異構體(tǐ)生(shēng)成的衍生(shēng)物色譜性能産生(shēng)較大(dà)差異而得(de)到分離。對一些(xiē)難分離的物質對也可(kě)以選用某些(xiē)衍生(shēng)化試劑,隻使其中一個(gè)發生(shēng)衍生(shēng)化反應轉化成衍生(shēng)物,兩者可(kě)得(de)到分離。
④利用衍生(shēng)化反應可(kě)以幫助化合物結構的鑒定,這點在使用色譜-質譜,色譜-紅外光譜和(hé)色譜-核磁共振波譜聯用方法确定化合物結構時(shí)作(zuò)用更加明(míng)顯。
不同模式的色譜柱前衍生(shēng)化的目的有(yǒu)不同的側重,氣相色譜中柱前衍生(shēng)化主要是改善目标化合物的揮發性;而液相色譜和(hé)薄層色譜中柱前衍生(shēng)化的主要目的是改善檢測能力。所以不同模式的色譜柱前衍生(shēng)化的方法和(hé)所用的衍生(shēng)化試劑也略有(yǒu)不同。
2. 柱前衍生(shēng)化的條件
色譜中柱前衍生(shēng)化使用的衍生(shēng)化反應應滿足以下幾個(gè)條件:
① 衍生(shēng)化反應要既迅速又完全,便于計(jì)算(suàn)衍生(shēng)物的含量及定量計(jì)算(suàn)。
② 反應的選擇性高(gāo),最好隻與目标化合物反應,即反應要有(yǒu)專一性。
③ 衍生(shēng)化反應産物隻有(yǒu)一種,反應的副産物和(hé)過量的衍生(shēng)化試劑應不幹擾目标化合物的分離與檢測。
④ 衍生(shēng)化試劑應方便易得(de),通(tōng)用性好。
總之,柱前衍生(shēng)化可(kě)以擴大(dà)色譜分析的應用範Χ,使色譜分析的結果能更令人(rén)滿意,所以柱前衍生(shēng)化是色譜樣品處理(lǐ)的一個(gè)重要方法。