柱後衍生(shēng)-高(gāo)效液相色譜-熒光檢測法測定水(shuǐ)中農藥呋喃丹
柱後衍生(shēng)-高(gāo)效液相色譜熒光檢測法測定水(shuǐ)中農藥呋喃丹.pdf
呋喃丹（克百威，Carbofuran)是一種內(nèi)吸型高(gāo)毒農藥，屬氨基甲酸酯類殺蟲劑，廣泛用于各種糧食作(zuò)物，對環境生(shēng)物毒性很(hěn)強，特别是鳥類，其在土壤中的殘蹈期較長，遷移性較大(dà)，在降水(shuǐ)量大(dà)、地下水(shuǐ)位淺的砂土地區(qū)易引起對地下水(shuǐ)的污染。美國EPA認為(wèi)呋喃丹對人(rén)的神經有(yǒu)毒害作(zuò)用，飲用水(shuǐ)中呋喃丹限值為(wèi)0.04mg/八。我國也将其列為(wèi)高(gāo)毒性農藥，規定不得(de)使用和(hé)限制(zhì)使用，在漁業水(shuǐ)質标準2、新版的生(shēng)活飲用水(shuǐ)衛生(shēng)标準)對其限定值分别為(wèi)0.01和(hé)0.007mg/L。
目前報道(dào)的呋喃丹檢測方法有(yǒu)氣相色譜一氨磷檢測器(qì)固相萃取一液相色譜紫外檢測、液質直接進樣測定等4衛生(shēng)部發布的《生(shēng)活飲用檢驗方法》(GB5750-2006)中使用高(gāo)效液相柱後衍生(shēng)法測定水(shuǐ)中的呋喃丹，筆者參照國标方法，并結合實驗室自身條件，采用固相萃取一柱後衍生(shēng)高(gāo)效液相色譜熒光檢測法測定水(shuǐ)中呋喃丹的含量，簡化了水(shuǐ)樣的前處理(lǐ)步稀，提高(gāo)了檢測靈敏度，避免了雜質于擾，定性、定量、準确可(kě)靠，完全能滿足水(shuǐ)質監測的要求。
1材料與方法
1.1儀器(qì)與試劑
Agilent1100高(gāo)效液相色譜儀，自動進樣器(qì)，熒光檢測器(qì)；Pickering Vector PCX柱後衍生(shēng)儀；氮吹儀N-EVAP;Supelco固相萃取裝置，Supelclean ENVI-.l8SPE小(xiǎo)柱(6ml);氨基甲酸酯類農藥分析C18專用柱(4.6mm×150mm),ChemStation色譜工作(zuò)站(zhàn)。
呋喃丹（國家(jiā)标準物質研究中心），甲醇（默克公罰，色譜純)，氨基甲酸酯測試混标、鄰苯二甲醛(OPA)、2-巯基乙醇(Thiofluor)均為(wèi)Pickering實驗室生(shēng)産，試驗用水(shuǐ)電(diàn)導大(dà)于18.0M/cm。衍生(shēng)試劑為(wèi)美國Pickering公司生(shēng)産的試劑包，含鄰苯二甲醛溶液(ct.NoCB910)和(hé)水(shuǐ)分解衍生(shēng)試劑(cat.NoCB130)。
1.2測定條件
柱後衍生(shēng)儀條件：反應器(qì)，100℃，0.5m；反應器(qì)2，環境遨度，0.】ml;衍生(shēng)試劑流速0.3ml/min。
液相色譜條件：梯度洗脫（程序見表1、2），柱溫42℃，流動相為(wèi)甲醇、水(shuǐ)，熒光檢測器(qì)Aex330nm、Aem465nm,流動
相流速1,0ml/min。保留時(shí)間(jiān)定性，蜂面積定量。
表1固相萃取流動相的梯度洗脫程序
Table 1 The gradient elution program of solid phase extraction mobile phase
1.3衍生(shēng)試劑的配制(zhì)
衍生(shēng)試劑1：将水(shuǐ)分解衍生(shēng)試劑C130直接注入到1号試劑瓶中，搖勻，蓋上(shàng)瓶蓋，通(tōng)氮氣至少(shǎo)10min,待用。至少(shǎo)可(kě)保存1周。
衍生(shēng)試劑2：注入945ml0PA稀釋劑(CB910)到2号試劑瓶中，蓋上(shàng)瓶蓋用氨氣吹掃至少(shǎo)10mi。在吹掃時(shí)，稱取100 mg OPA固體(tǐ)溶解于10ml的甲醇中，用5 ml OPA稀釋液(CB910)溶解2g2-巯基乙醇固體(tǐ)，配制(zhì)好後，立即将以上(shàng)2種溶液分别迅速加人(rén)到2号已去氧的試劑瓶中(OPA在空(kōng)氣中極易被氧化，2巯基乙醇惡臭)，蓋上(shàng)瓶蓋，打開(kāi)氣流，再不斷地吹掃幾分鍾，關閉排氣閥，輕輕地攪動溶劑以使其完全混合。至少(shǎo)可(kě)保存1周。
1.4樣品的采集與保存
用棕色玻璃瓶采集水(shuǐ)樣200ml,采樣時(shí)不得(de)留有(yǒu)頂上(shàng)空(kōng)間(jiān)和(hé)氣泡，呋喃丹在堿性及中性條件下不穩定，用硫酸調節水(shuǐ)樣pH值<2.0。當水(shuǐ)中有(yǒu)餘氯存在時(shí)加人(rén)硫代硫酸鈉1，使其在水(shuǐ)中的濃度約80mg/L,并混勻。水(shuǐ)樣采集後應盡快分析，若不能及時(shí)分析，應避光保存于4℃下冷藏，但(dàn)不超過7d。
1.5水(shuǐ)樣前處理(lǐ)
分别依次用10m甲醇、純水(shuǐ)浸潤和(hé)淋洗SPE小(xiǎo)柱，活化備用。取200ml水(shuǐ)樣，以5ml/min左右的流量通(tōng)過SPE柱。富集完畢後，用10m純水(shuǐ)淋洗小(xiǎo)柱，吹幹小(xiǎo)柱，然後用6l甲醇分2次洗脫SPE柱，收集淋洗液，氮氣吹至近幹後，用甲醇定容至1ml,上(shàng)機測定。
2結果與分析
2.1，12種氨基甲酸酯标準色譜圖
氨基甲酸酯測試混标(約2.5mg/L)進樣5l,标準色譜圖見圖1。出峰時(shí)間(jiān)先後排列為(wèi)：涕滅威亞砜5.70min、涕滅威砜6.28min、殺線威6.97min、滅多(duō)威7.84min、3-羟基呋喃12.78min、涕滅威16.35min、殘殺威19.99min、呋喃丹20.39min、甲萘威21.62min、1-萘酚22.55min、甲硫減27.88min、4-溴-3,5-二甲苯基-N-甲基氨基甲酸酯28.64min。從色譜圖來(lái)看12種氨基甲酸酯在此條件下測試均有(yǒu)良好的峰型和(hé)分離度，說明(míng)該試險方法不僅适用于呋喃丹的檢測，也适用以上(shàng)其他氨基甲酸酯類的定性檢測。
2.2标準曲線線性範圍
準确吸取呋喃丹标準樣品，配置标準系列溶液，濃度分别為(wèi)50、100、250、5000、1000g/L,以所得(de)響應值（峰面積）與濃度進行(xíng)回歸分析。結果表明(míng)，線性相關系數(shù)為(wèi)0.9998，線性關系良好，符合定量測試的要求。
2.3檢測限、回收率
以3倍信噪比(S/N)計(jì)算(suàn)，在進樣量10l時(shí)，計(jì)算(suàn)得(de)到呋喃丹的最低(dī)檢測質量為(wèi)0.072g,若取水(shuǐ)樣200ml經富集後測定，水(shuǐ)樣檢測限達0.036g/L。
分别配置0.6、1.0和(hé)3.0g/L的自來(lái)水(shuǐ)、河(hé)水(shuǐ)加标水(shuǐ)樣，按“1.5”方法進行(xíng)處理(lǐ)測定，計(jì)算(suàn)回收率和(hé)精密度。測定結果表明(míng)，2種組分平均回收率分94.3%96.3%及91.5%~92.4%:6次平行(xíng)測定的相對标準偏差分别為(wèi)8.0%~10.2%及8.4%~9.9%，均滿足定量分析要求，結果見表3。
表3’呋喃丹的回收率及精密度測定結果(n=6)
2,4大(dà)體(tǐ)積直接進樣法測定
參照美國環境保護署EPA的方法531.1，采用直接大(dà)體(tǐ)積進水(shuǐ)樣試驗（梯度方法見表2)。為(wèi)了避免水(shuǐ)蜂的影(yǐng)響，梯度洗脫與固相萃取濃縮甲醇進樣（表1）有(yǒu)所不同。安捷倫一般的液相色譜儀的最大(dà)進樣
量為(wèi)100l,直接進樣100l,對加标濃度60,200g/L的自來(lái)水(shuǐ)、河(hé)水(shuǐ)各進樣6次，試驗結果表明(míng)氨基甲酸酯混标的12種物質均有(yǒu)具有(yǒu)良好的峰型和(hé)分離度，2種加标濃度的呋喃丹在自來(lái)水(shuǐ)和(hé)河(hé)水(shuǐ)中的平均回收率及相對标準偏差見表3。
按3倍的信噪比計(jì)算(suàn)檢出限約為(wèi)90吧(ba)北遠低(dī)毛生(shēng)濟件用水(shuǐ)衛生(shēng)标準(GB/T5749-2006)》中的限制(zhì)值70甲g憑，完全能滿足國标的要求。
3結論
該研究采用固相萃取提取柱後衍生(shēng)法高(gāo)效液相色譜測定水(shuǐ)中的呋喃丹，靈敏度高(gāo)、選擇性好，能分離包括呋喃丹在內(nèi)的12種氨基甲酸酯，從而全面監測水(shuǐ)中的氨基甲酸酯類污染物。固相萃取前處理(lǐ)方法用甲醇進行(xíng)洗脫，回收率高(gāo)且穩定。線性關系和(hé)重現性等方法學指标，均能較好地滿足相關單位對檢測方法的要求。直接進水(shuǐ)樣測定，省去了繁瑣的水(shuǐ)樣前處理(lǐ)過程，提高(gāo)了檢測速度，對突發的水(shuǐ)污染事件能迅速地進行(xíng)半定量分析，及時(shí)作(zuò)出判斷，更好地服務于水(shuǐ)質監測工作(zuò)，确保供水(shuǐ)安全。
完整論文見下圖
