高(gāo)效液相色譜儀的衍生(shēng)化技(jì)術(shù)

高(gāo)效液相色譜儀的衍生(shēng)化技(jì)術(shù)衍是指将用通(tōng)常檢測方法不能直接檢測或檢測靈敏度比較低(dī)的物質與某種試劑（即衍生(shēng)化試劑）反應，使之生(shēng)成易于檢測的化合物的過程。按衍生(shēng)化方法可(kě)分為(wèi)柱前衍生(shēng)化和(hé)柱後衍生(shēng)化。

一、柱前衍生(shēng)化：

柱前衍生(shēng)化是指将被測物轉變成可(kě)檢測的衍生(shēng)物後，再通(tōng)過色譜柱分離。

這種衍生(shēng)化可(kě)以是在線衍生(shēng)化，即将被測物和(hé)衍生(shēng)化試劑分别通(tōng)過兩個(gè)輸液泵送到混合器(qì)裏混合并使之立即反應完成，随之進入色譜柱；也可(kě)以先将被測物和(hé)衍生(shēng)化試劑反應，再将衍生(shēng)物作(zuò)為(wèi)樣品進樣；也可(kě)以在流動相中加入衍生(shēng)化試劑，進樣後，讓被測物與流動相直接發生(shēng)衍生(shēng)化反應。

二、柱後衍生(shēng)化：

柱後衍生(shēng)化是指先将被測物分離，再将從色譜柱流出的溶液與衍生(shēng)化試劑在線混合，生(shēng)成可(kě)檢測的衍生(shēng)物，然後導入檢測器(qì)。按生(shēng)成衍生(shēng)物的類型可(kě)分為(wèi)紫外可(kě)見光衍生(shēng)化、熒光衍生(shēng)化、拉曼衍生(shēng)化和(hé)電(diàn)化學衍生(shēng)化等。

1、紫外可(kě)光見衍生(shēng)化：

（1）紫外衍生(shēng)化是指将紫外吸收弱或無紫外吸收的有(yǒu)機化合物與帶有(yǒu)紫外吸收基團的衍生(shēng)化試劑反應，使之生(shēng)成可(kě)以用紫外檢測的化合物。如胺類化合物容易與鹵代烴、羰基、酰基類衍生(shēng)試劑反應。

（2）可(kě)見光衍生(shēng)化有(yǒu)兩個(gè)主要的應用：一是用于過渡金屬離子的檢測，将過渡金屬離子與顯色劑反應，生(shēng)成有(yǒu)色的配合物、螯合物或離子締合物後用可(kě)見光檢測；二是用于有(yǒu)機離子的檢測，在流動相中加入被測離子的反離子，使之形成有(yǒu)色的離子對化合物後，分離檢測。

2、熒光衍生(shēng)化：

熒光衍生(shēng)化是指将被測物與熒光衍生(shēng)化試劑反應後生(shēng)成具有(yǒu)熒光的物質進行(xíng)檢測。

有(yǒu)的熒光衍生(shēng)化試劑本身沒有(yǒu)熒光，而其衍生(shēng)物卻有(yǒu)很(hěn)強的熒光。

衍生(shēng)化技(jì)術(shù)不僅使高(gāo)效液相色譜儀分析體(tǐ)系複雜化，而且需要消耗時(shí)間(jiān)，增加分析成本，有(yǒu)的衍生(shēng)化反應還(hái)需要控制(zhì)嚴格的反應條件。因此，隻有(yǒu)在找不到方便而靈敏的檢測方法或為(wèi)了提高(gāo)分離檢測的選擇性時(shí)，才考慮用衍生(shēng)化技(jì)術(shù)。